大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相载体包被大鼠sPLA2特异性抗体，加入梯度标准品及待测大鼠血清、组织样本，样本中的sPLA2抗原被固相抗体特异性捕获，洗涤去除非特异性反应物，加入辣根过氧化物酶标记的sPLA2检测抗体，形成稳定免疫复合物，洗涤后底物显色，显色强度与sPLA2含量成正比，终止后通过标准曲线完成定量分析。
基本参数‌：

产品名称：大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒

英文名称：sPLA2 ELISA Kit
货号：Y-E1020

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，可检测大鼠血清、炎症组织中低浓度sPLA2

检测范围：0.2ng/mL～18ng/mL，适配大鼠炎症、氧化应激模型检测需求

反应时间：总时长95分钟，抗体孵育65分钟，显色反应30分钟，操作简便快速

保存条件：2～8℃避光冷藏保存，终止液可室温避光存放，其余组分低温保存

有效期：原装未开封有效期6个月，开封后28天内使用完毕

显色系统：经典TMB双液显色系统，反应温和，无过度显色现象

检测波长：450nm单一主波长检测，无需额外校正，数据精准

标准曲线绘制：6梯度标准稀释浓度，四参数拟合，R²≥0.995，线性相关性优异

特异性：特异性识别大鼠分泌型磷脂酶A2，与胞内磷脂酶无交叉反应，物种特异性强

重复性：板内变异系数≤4.2%，板间变异系数≤6.2%

注意事项：样本需去除血脂、溶血成分，避免干扰抗原抗体结合；孵育温度严格恒定，温差过大影响实验结果；显色时间精准把控，统一终止时间；试剂取用避免交叉污染。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 26min，洗涤液 1:22 稀释，大鼠炎性腹腔液低温离心取上清。

微孔板分孔添加 100μL sPLA2 标准品、腹腔上清、空白稀释液。

酶偶联二抗 100μL 每孔，覆膜 37℃孵育 74min。

洗涤浸泡 38s，洗涤 5 次，彻底拍干微孔残留液体。

避光显色液 100μL，室温避光显色 20min。

硫酸终止液中和显色体系，摇匀微孔。

酶标仪测 OD450，计算分泌型磷脂酶 A2 浓度。
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