大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术，固相酶标板固定大鼠TE特异性抗体，加入梯度标准品和待测大鼠细胞组织样本，样本中的端粒酶抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离反应物，加入HRP标记的TE检测抗体，形成夹心免疫复合物，经洗涤纯化后加入显色底物显色，显色强度与样本TE含量正相关，终止反应后通过标准曲线完成定量分析。
基本参数‌：

产品名称：大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒

英文名称：TE ELISA Kit
货号：Y-E1435

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.5U/L

检测范围：1.0U/L - 60U/L

反应时间：总反应时长120分钟（酶结合90分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光保存，端粒酶试剂低温密封，严禁高温

有效期：未开封12个月，开封后15天内用完

显色系统：高稳定酶促TMB显色体系，适配端粒酶活性检测

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：活性单位梯度标准品拟合四参数曲线，精准定量酶活性

特异性：特异性检测大鼠端粒酶，与其他聚合酶无交叉识别

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：全程低温操作，端粒酶极易失活；样本裂解后立即检测，不可长时间存放。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒提前 28min 室温复温，浓缩洗涤液 1:22 稀释，大鼠细胞裂解上清避免反复冻融。

酶标板每孔加 100μL TE 梯度标准品、细胞上清、空白缓冲液。

酶标记捕获抗体 100μL / 孔，密封 37℃孵育 73min。

洗涤浸泡 37s，洗 4 次，拍干微孔。

避光显色底物 100μL，37℃显色 16min。

滴加终止液充分混匀微孔液体。

450nm 检测 OD，定量端粒酶 TE 活性蛋白浓度。
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