大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，预先在酶标板包被大鼠AIF特异性单克隆抗体，加入标准品和待测大鼠组织细胞样本，样本中的AIF抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合成分，加入酶标记的AIF多克隆抗体形成夹心免疫复合物，充分洗涤后加入TMB底物显色，酶促反应产物的吸光度值与样本AIF含量成正比，终止后依据标准曲线精准定量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒

英文名称：AIF ELISA Kit
货号：Y-E1079

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.7ng/mL

检测范围：1.4ng/mL - 55ng/mL

反应时间：总反应时长110分钟（抗体孵育80分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光密封保存，AIF抗体单独存放

有效期：原装试剂盒12个月有效期

显色系统：高灵敏度TMB显色体系，适配线粒体凋亡因子检测

检测波长：450nm/630nm双波长检测

标准曲线绘制：梯度标准品拟合四参数曲线，R²≥0.991

特异性：特异性检测大鼠AIF蛋白，与其他凋亡诱导蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：组织样本需充分裂解，提取完整蛋白；避免样本高温放置，防止AIF降解。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温平衡 30min，洗涤液 1:27 稀释，大鼠线粒体裂解上清全程低温操作。

酶标板每孔加入 100μL 梯度 AIF 标准蛋白、线粒体上清、空白液。

酶偶联特异性抗体 100μL 每孔，封板 37℃孵育 76min。

洗涤浸泡 44s，洗涤 5 次，垂直拍干微孔残留液体。

避光显色底物 100μL，室温避光显色 20min。

硫酸终止液中和显色体系，震荡微孔。

450nm 检测 OD 值，定量 AIF 凋亡蛋白含量。
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