大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 原理，固相微孔板包被抗大鼠 TLR9 捕获抗体，样本中 TLR9 蛋白结合固相抗体，洗板去除游离组分，加入酶标记抗 TLR9 检测抗体构建免疫夹心复合物，TMB 显色读取 OD 值，对照标准曲线实现定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤2.8pg/mL

检测范围：7pg/mL - 2000pg/mL

反应时间：总反应时长150分钟（60分钟样本结合+30分钟二抗结合+30分钟显色）

保存条件：2-8℃避光冷藏，试剂开封后密封保存，1周内用完

有效期：未拆封试剂盒12个月

显色系统：HRP-TMB显色体系，酸性终止液终止反应

检测波长：450nm

标准曲线绘制：梯度标准品OD值拟合四参数标准曲线，定量检测样本TLR9含量

特异性：特异性结合大鼠TLR9蛋白，与其他Toll样受体无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：样本无核酸污染，避免核酸干扰受体检测；实验操作轻柔，避免孔壁损伤；终止后10分钟内完成读数。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温复温 27min，浓缩洗涤液 1:20 稀释，酶结合物混匀后使用。

标准品稀释：TLR9 冻干标准品溶解后配置梯度浓度，设置空白对照孔。

样本加样：标准孔 50μL 梯度标准液，免疫细胞裂解样本 50μL 上样。

孵育反应：每孔 50μL HRP 标记 TLR9 抗体，封膜 37℃避光孵育 64min。

洗板：洗涤液浸泡 34s，拍干，循环洗板 5 次。

显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃孵育 18min。

终止检测：终止液混匀，7min 内 450nm 读数，换算 TLR9 浓度。