大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，将抗大鼠MCP-1特异性抗体固定于酶标板微孔内，加入标准品及待测大鼠生物样本，样本中的MCP-1抗原与固相抗体发生特异性免疫结合，洗板去除未结合游离成分，加入辣根过氧化物酶标记的MCP-1二抗，形成稳定的免疫夹心结构，经洗涤纯化后加入底物显色，显色程度与样本中MCP-1浓度呈正相关，终止显色后测定吸光度，对照标准曲线即可完成样本中MCP-1的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒

英文名称：MCP-1/MCAF ELISA Kit
货号：Y-E1499

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤1.5pg/mL

检测范围：3.0pg/mL - 120pg/mL

反应时间：总反应时长90分钟（37℃温育60分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光密封保存，浓缩试剂避免挥发浓缩

有效期：原装完整试剂盒12个月

显色系统：TMB底物显色系统，适配细胞因子低浓度检测

检测波长：450nm单波长定量检测

标准曲线绘制：8个梯度标准品浓度拟合曲线，R²≥0.990，四参数回归计算样本浓度

特异性：特异性识别大鼠MCP-1，与MCP-2、MCP-3等趋化因子无交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤9%

注意事项：细胞上清、血清样本均可检测，浑浊样本需离心澄清；显色严格控制15-20分钟，避免过显色。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温放置 30min，浓缩洗涤液 1:22 稀释，大鼠细胞培养上清样本过滤去除细胞残渣。

酶标板各孔添加 100μL 梯度标准品、待测上清、空白缓冲液。

一步酶结合工作液每孔 100μL，密封酶标板，37℃避光孵育 65min。

洗板：浸泡 30s，洗涤 4 次，吸水纸拍干微孔。

避光 TMB 显色 100μL，37℃孵育 14min。

终止液 50μL 中和显色体系，摇匀。

检测 450nm 吸光值，计算 MCP-1 表达水平。
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