大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA反应原理，固相载体包被大鼠Big ET特异性捕获抗体，加入标准品与待测大鼠样本后，样本内的Big ET抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合物质，加入酶标记的Big ET检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，充分洗涤后加入底物显色体系进行显色反应，反应终止后检测各孔OD值，根据标准曲线的浓度-吸光度对应关系，定量检测大鼠样本中Big ET的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒

英文名称：Big ET ELISA Kit
货号：Y-E1604

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤2.0pg/mL

检测范围：5.0pg/mL - 160pg/mL

反应时间：总反应时长100分钟（抗原抗体结合70分钟、显色30分钟）

保存条件：所有组分2-8℃避光保存，禁止冻融试剂

有效期：未开封12个月，开盖试剂1个月内用完

显色系统：高灵敏度TMB显色体系，低背景、高显色梯度

检测波长：450nm（检测）、630nm（校正）

标准曲线绘制：梯度标准品检测后，四参数Logistic拟合标准曲线，满足定量检测要求

特异性：特异性结合大鼠Big ET，不识别成熟内皮素及其他血管活性肽

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤10%

注意事项：内皮素稳定性极差，样本采集后立即冰上保存、快速离心；避免反复冻融样本，否则会导致蛋白降解、结果偏低。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒 4℃试剂提前 35min 取出回温，洗涤液 1:30 稀释，大鼠血浆样本冰浴保存防止内皮素降解。

微孔板每孔加入 100μL 标准品 / 大鼠血浆 / 空白稀释液，标记区分各组孔位。

同步加入酶标特异性抗体 100μL，封膜避光，37℃孵育 70min。

倾倒废液，洗涤液浸泡微孔 35s，重复洗涤 4 次，吸干水分。

避光加显色底物 100μL，37℃避光显色 16min。

加入终止液终止反应，混匀 30s。

酶标仪读取 OD450，标准曲线定量大鼠 Big ET 含量。
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