大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接ELISA检测原理，将纯化的大鼠GNRHR抗原包被于酶标板微孔，封闭非特异性结合位点后，加入待测大鼠样本及标准品，样本中的GNRHR-Ab会与固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合成分，再加入酶标记的二抗与结合的抗体特异性结合，经洗涤后加入底物显色液进行显色，终止反应后测定吸光度，显色强度与样本中GNRHR-Ab含量成正比，依据标准曲线即可计算出样本中抗体的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒

英文名称：GNRHR-Ab ELISA Kit
货号：Y-E1072

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测滴度1:20，最低定量浓度≤0.2μg/mL

检测范围：0.5μg/mL - 20μg/mL

反应时间：总反应时长120分钟（包被结合60分钟、抗体孵育40分钟、显色20分钟）

保存条件：2-8℃避光保存，抗体组分严禁冷冻、高温环境放置

有效期：未开封12个月，开封后密封保存，2周内使用完毕

显色系统：高灵敏度TMB显色体系，快速显色、背景值低

检测波长

标准曲线绘制：标准品梯度稀释，测定OD值后采用四参数Logistic回归拟合曲线

特异性：特异性结合大鼠GNRHR抗体，与其他激素抗体无交叉反应，特异性极强

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤11%

注意事项：避免样本中存在异嗜性抗体干扰；显色时间需严格统一，超时会导致背景升高；终止液具有腐蚀性，操作需佩戴防护手套。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒全部组分室温复温 25min，配制 1:25 稀释洗涤缓冲液，大鼠血浆样本低速离心去除杂质沉淀。

酶标微孔板区分阴性对照孔、标准抗体孔、待测大鼠样本孔，各孔分别加入 100μL 对应液体。

直接加入酶偶联抗原工作液 100μL，封板，37℃恒温孵育 50min，全程避光操作。

洗涤操作：每孔加满洗涤液浸泡 20s，弃液重复洗涤 3 次，倒置板条吸干水分。

避光加入显色混合液 100μL，室温避光显色 12min，不可延长孵育时间。

加终止液 50μL 终止免疫显色反应，震荡混匀微孔内液体。

酶标仪 450nm 测吸光度，比对标准曲线判定大鼠体内 GNRHR-Ab 抗体含量。
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