大鼠Smad7 ELISA试剂盒

采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相载体包被抗大鼠 Smad7 捕获抗体，样本内源 Smad7 蛋白特异性吸附于微孔，洗涤后添加 HRP 标记抗 Smad7 检测抗体构建夹心免疫复合物，TMB 底物显色，酶标仪读数对照标准曲线完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤1.8pg/mL

检测范围：4pg/mL - 1000pg/mL

反应时间：总反应时长180分钟（90分钟样本结合+30分钟二抗结合+30分钟显色）

保存条件：2-8℃避光冷藏，严禁冷冻，开封试剂7天内使用完毕

有效期：原装未开封试剂盒12个月

显色系统：高灵敏度TMB显色体系，背景值低、显色稳定

检测波长：450nm

标准曲线绘制：标准品梯度浓度对应OD值，四参数Logistic回归拟合曲线，计算样本浓度

特异性：特异性结合大鼠Smad7蛋白，与其他Smad家族拮抗蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤9%

注意事项：样本避免高温处理，防止蛋白变性；温育过程密封避光，防止液体蒸发浓缩；标准品稀释精准，避免曲线偏差。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：全部试剂室温放置 26min，20× 洗涤液蒸馏水稀释备用。

标准品配制：Smad7 标准品溶解后倍比稀释，6 组梯度，双复孔检测。

样本加样：标准孔 50μL 梯度标准液，细胞 / 组织裂解样本 50μL 上样。

共孵育：每孔 50μL HRP 标记 Smad7 抗体，密封 37℃避光孵育 56min。

洗板：洗涤液浸泡 30s，彻底拍干，洗板 5 次。

显色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 15min。

终止读数：终止液混匀，6min 内 450nm 测 OD 值，换算 Smad7 浓度。