大鼠P物质(SP)ELISA试剂盒

竞争型酶联免疫吸附原理，微孔板预包被 SP 重组抗原，样本内源性 SP 与固相抗原竞争结合酶标抗 SP 抗体，孵育洗涤后底物显色，SP 含量与显色吸光度呈负相关，结合梯度标准品绘制标准曲线，定量检测血清、组织上清等样本中大鼠 P 物质含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤1.0pg/mL

检测范围：2pg/mL - 800pg/mL

反应时间：总反应时长120分钟（样本温育60分钟+洗板+显色30分钟+终止读数）

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，洗涤液、终止液可常温避光存放，开封试剂7日内用完

有效期：原装未开封12个月

显色系统：HRP标记二抗介导TMB显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：以标准品梯度浓度为横轴，OD检测值为纵轴，四参数拟合标准曲线，计算样本浓度

特异性：特异性结合大鼠P物质，与神经肽A、神经肽B等同类神经肽无明显交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：血清、血浆样本需无溶血、无浑浊，反复冻融样本会导致SP降解，影响检测结果；温育需恒温37℃，温度波动会导致实验误差。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：全部试剂室温放置 30min，浓缩洗涤液按 1:20 稀释混匀备用，底物液全程避光存放。

标准品梯度配制：SP 冻干标准品溶解后连续稀释 7 个梯度，设置空白对照孔，所有梯度做双复孔。

加样操作：标准孔 50μL 标准液，血清 / 脑脊液样本孔加 50μL 待测样本，空白孔加入稀释液 50μL。

酶标抗体孵育：每孔添加 50μL HRP 标记 SP 检测抗体，密封酶标板，37℃避光孵育 70min。

洗板流程：弃液加满洗涤液浸泡 40s，吸水纸拍干，重复洗板 6 次，降低非特异性结合背景。

显色反应：各孔添加底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 15min，观察蓝色梯度分层。

终止读数：终止液 50μL 混匀，10min 内 450nm 读取吸光值，标准曲线计算样本 SP 含量。