大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 原理，酶标板固定抗 JNK 捕获抗体，样本中丝裂原活化激酶 JNK 结合固相载体，酶标检测抗体形成夹心免疫复合物，洗涤显色后依据标准曲线定量 JNK 蛋白含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.08ng/mL，精准检测大鼠JNK激酶微量表达变化

检测范围：0.15ng/mL - 90ng/mL，覆盖大鼠氧化应激、炎症、凋亡模型样本浓度

反应时间：总反应时长135分钟，样本孵育75分钟，酶孵育30分钟，显色15分钟，终止5分钟

保存条件：核心试剂2 - 8℃避光冷藏，禁止冻存，微孔板条单独密封防潮

有效期：原装试剂盒有效期6个月，储存条件合规可稳定保质

显色系统：高灵敏TMB显色体系，背景极低，显色区分度优异

检测波长：450nm检测，570nm校正背景误差

标准曲线绘制：7点梯度标准浓度，四参数逻辑拟合，R²≥0.996

特异性：特异性识别大鼠JNK激酶，无其他激酶、转录因子交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，重复性优异

注意事项：组织匀浆需低温制备，防止激酶蛋白失活；孵育全程湿盒保湿，避免孔内液体蒸发浓缩；严格控制显色时间，避免过显色或显色不足
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温静置 27min，浓缩洗涤液稀释 20 倍，组织蛋白上清室温平衡。

标准品稀释：JNK 标准品稀释配制 6 梯度标准液，空白对照孔。

加样孵育：各孔 50μL 标准品、样本，酶结合物 50μL，37℃避光孵育 62min。

洗板操作：洗涤液浸泡 33s，拍干残液，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 16min。

终止读数：终止液混匀，9min 内读取 450nm 吸光值。

数据计算：标准曲线定量 JNK 激酶蛋白，评价 MAPK 应激通路。