大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 原理，微孔板预包被抗大鼠 CD44 捕获抗体，样本可溶性 CD44 结合板底，加入酶标记检测抗体形成夹心结构，洗涤显色读数，定量细胞黏附与肿瘤转移标志物 CD44。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，可有效检测大鼠CD44低丰度表达样本

检测范围：0.2ng/mL - 120ng/mL，覆盖生理、病理状态下大鼠CD44表达浓度

反应时间：总反应时长125分钟，样本孵育65分钟，酶孵育30分钟，显色15分钟，终止5分钟

保存条件：2 - 8℃避光冷藏保存，禁止冷冻抗体及显色试剂，洗涤液室温保存

有效期：原装试剂盒有效期6个月，开封后板条、试剂需1个月内使用完毕

显色系统：高稳定性TMB显色体系，显色均匀，梯度差异明显

检测波长：450nm主波长检测，630nm校正背景

标准曲线绘制：6点梯度浓度，四参数逻辑拟合，R²≥0.995，曲线线性度良好

特异性：仅识别大鼠CD44黏附分子，与其他黏附因子、免疫分子无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，实验数据重复性稳定

注意事项：组织样本需充分匀浆、离心取上清，避免杂质干扰；试剂混匀轻柔，避免剧烈震荡产生泡沫；终止后及时上机检测，防止颜色衰减
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂平衡：试剂室温静置 26min，浓缩洗涤液稀释 20 倍，肿瘤组织匀浆混匀。

标准品稀释：CD44 标准品稀释配制 6 梯度标准液，空白调零孔。

加样孵育：各孔 50μL 标准品、样本，酶结合物 50μL，37℃避光孵育 61min。

洗板操作：洗涤液浸泡 32s，拍干，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 15min。

终止读数：终止液混匀，9min 内读取 450nm 吸光值。

数据计算：曲线定量 CD44，评价肿瘤侵袭转移相关蛋白。