大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA核心检测原理，微孔板包被纯化的大鼠LN特异性捕获抗体，加入标准品及大鼠血清、组织样本后，样本中的LN抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除非特异性结合物质，加入辣根过氧化物酶标记的LN检测抗体形成夹心复合物，底物显色后根据吸光度数值，结合标准曲线定量测定大鼠样本中LN的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒

英文名称：LN ELISA Kit
货号：Y-E1648

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出限0.2ng/mL，可精准检测大鼠组织基底膜中微量LN蛋白。

检测范围：1ng/mL - 20ng/mL，适配大鼠血清、肝组织、肾组织、肺组织匀浆样本。

反应时间：整体实验120分钟，样本孵育45min、酶标抗体孵育30min、显色30min、终止读数5min。

保存条件：2 - 8℃避光冷藏，禁止冷冻，冷冻会导致抗体蛋白变性失活；洗涤液常温避光保存即可。

有效期：原装试剂盒有效期6个月，常温暴露超过2小时会缩短使用寿命。

显色系统：稳定型TMB显色体系，无自发显色，空白孔背景值极低。

检测波长：450nm标准检测波长，搭配630nm参比波长校正误差。

标准曲线绘制：七梯度标准品浓度梯度，四参数拟合曲线，R²≥0.993，线性范围宽泛。

特异性：特异性结合大鼠层连蛋白，与胶原蛋白、纤连蛋白等胞外基质蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤4.5%，板间CV≤6.5%，满足科研实验重复性要求。

注意事项：组织匀浆样本需充分裂解、高速离心取上清，避免组织残渣干扰；孵育过程避免孔板晃动，防止液体溅出影响结合效果；实验结束后及时清洗酶标仪探头。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

LN 标准品梯度稀释，试剂盒室温平衡 27min，分置酶标板三组微孔；

标准孔、待测孔添加 50μL 标准品、大鼠组织匀浆上清，空白孔补稀释液；

即刻加入 100μL 酶标抗 LN 抗体，覆膜封闭；

37℃恒温孵育 58min，一步完成免疫结合反应；

洗涤缓冲液浸泡 30s，吸干，循环洗板 5 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 16min；

终止液终止反应，450nm 测吸光度，计算 LN 含量。
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