人双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白 新品

人双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白开展丝氨酸 / 苏氨酸激酶体外活性测定、上皮间质转化、肿瘤侵袭转移相关分子机制体外研究实验。

型号：YS-DB2873

产品名称：人双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Doublecortin Like Kinase 3 (DCLK3)

DCAMKL3; DCDC3C; Doublecortin And CaM Kinase-Like 3; Doublecortin domain-containing protein 3C; Serine/threonine-protein kinase DCLK3

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞核, 细胞质

预测分子量：55kDa

实际分子量：55kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Met1~Met221 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：9.6

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

ATP 依赖型丝苏氨酸磷酸转移反应：DCLK3 消耗 ATP，对特异性多肽底物进行位点磷酸化修饰。

荧光激酶底物检测体系：磷酸化前后底物荧光极化值改变，通过荧光极化数值变化定量 DCLK3 活性。

WB 蛋白分子量与纯度鉴定：特异性抗体杂交确认 DCLK3 重组蛋白表达无误。

家族亚型底物区分试验：对比 DCLK1/2 底物活性差异，确认检测活性归属 DCLK3。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。