人肉毒碱-O-甲基转移酶(CORT)重组蛋白 新品

人肉毒碱-O-甲基转移酶(CORT)重组蛋白开展肉碱甲基化代谢体外酶活检测、脂肪酸跨线粒体转运调控、脂质能量代谢相关体外功能研究实验。

型号：YS-DB2323

产品名称：人肉毒碱-O-甲基转移酶(CORT)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Carnitine-O-Octanoyltransferase (CORT)

COT; CROT; Peroxisomal Carnitine O-Octanoyltransferase

酶与激酶

代谢通路

神经科学

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：26.8kDa

实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Lys410~Leu612 with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

甲基转移催化基础原理：CORT 以 SAM（S - 腺苷甲硫氨酸）为甲基供体，将甲基转移至肉毒碱氧原子位点，生成 O - 甲基肉毒碱。

HPLC 分离甲基化产物定量：色谱分离底物肉毒碱与甲基化产物，峰面积计算甲基转移效率，测定酶活。

免疫印迹重组蛋白鉴定：CORT 特异性抗体验证蛋白分子量正确、纯度合格。

甲基供体缺失对照：去除 SAM 后无甲基化产物，证明反应由 CORT 特异性介导。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。