人妊娠上调节非广泛表达CaM激酶(PNCK)重组蛋白 新品

人妊娠上调节非广泛表达CaM激酶(PNCK)重组蛋白主要开展钙离子依赖激酶体外活性分析、胚胎发育调控、细胞增殖与妊娠相关信号通路体外验证实验。

型号：YS-DB2726

产品名称：人妊娠上调节非广泛表达CaM激酶(PNCK)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Pregnancy Up Regulated Non Ubiquitously Expressed CaM Kinase (PNCK)

CaMK1b; Pregnancy Upregulated Non-Ubiquitously Expressed CaM Kinase; Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type 1B

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：34.7kDa

实际分子量：35kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile68~Trp343 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.1

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

钙调素依赖性磷酸化催化：PNCK 结合 Ca²⁺- 钙调素复合物活化，催化下游靶蛋白丝氨酸 / 苏氨酸位点磷酸化。

同位素 γ-³²P-ATP 掺入检测：放射性磷酸基团转移至底物蛋白，分离后放射性计数定量激酶磷酸化活性。

免疫印迹蛋白鉴定：PNCK 特异性抗体验证重组蛋白分子量、完整性，确认目的蛋白正确表达。

钙离子依赖性验证：去除体系 Ca²⁺后激酶活性显著降低，匹配 PNCK 钙调素依赖激活的酶学特征。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。