人拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)重组蛋白 新品

商品属性：

型号：YS-DB602

产品名称：人拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Topoisomerase I (TOP1)

TOPI; DNA Topoisomerase 1

酶与激酶

发育科学

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞核

预测分子量：33.9kDa

实际分子量：40kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Met1~Ser250 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：9.4

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
核心参数：

开展 DNA 解旋松弛活性检测、DNA 复制转录调控研究、TOP1 靶向抗肿瘤药物体外筛选与抑制活性评价实验。
基础核心参数

基因定位 20q12-13.1；分子量～91 kDa；I 型拓扑异构酶，切断单链 DNA 松弛超螺旋，不消耗 ATP。

真核表达完整活性蛋白，喜树碱类药物可特异性抑制其酶活；生化实验经典工具蛋白。

核心生物功能

DNA 复制与转录解旋：释放 DNA 正负超螺旋张力，保障 DNA 复制叉推进、基因转录顺利起始延伸。

基因组稳定性维持：修复 DNA 扭转应力损伤；是拓扑异构酶抑制剂抗肿瘤药物核心作用靶点。
复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。

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