人甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重组蛋白 新品

人甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重组蛋白用于 MARS 氨基酰化酶活性测定、蛋白质翻译起始调控、肿瘤增殖及炎症相关分子互作体外实验。

型号：YS-DB2385

产品名称：人甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Methionyl tRNA Synthetase (MARS)

METRS; MTRNS; MetRS; Methionine tRNA Ligase 1,Cytoplasmic

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：17.7kDa

实际分子量：16kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Gly74~Leu198 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：4.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

Western Blot 身份鉴定：MARS 特异性抗体识别重组蛋白抗原位点，条带分子量匹配理论值，确认蛋白表达正确。

SDS-PAGE 纯度检测：电泳分离杂蛋白，灰度统计重组蛋白纯度。

氨酰化酶活检测：催化甲硫氨酸活化并连接至对应 tRNA，同位素 / 荧光标记法检测氨酰 - tRNA 生成量，定量合成酶活性。

氨基酸底物特异性验证：仅特异性识别 L - 甲硫氨酸完成氨酰化，不利用其他氨基酸，印证合成酶底物选择性。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。