HA tag（标签）单克隆抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:HA-tag; HA epitope tag; HA1; HA2; hemagglutinin; Hemagglutinin HA1 chain; Hemagglutinin HA2.

交叉反应:Species independent

抗体来源:Mouse

免疫原:KLH conjugated HA Tag

亚型:IgG1

性状:Size : 50ul/100ul/500ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Monoclonal

克隆号：4D1

理论分子量：

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/500ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

抗 HA 标签单克隆抗体，专为检测融合 HA 标签的重组蛋白设计。HA 标签常用于蛋白表达、亚细胞定位、蛋白互作等分子实验，本单克隆抗体亲和力高、特异性极强，仅识别 HA 标签序列，不与细胞内源蛋白结合，适配 WB、IP、IF、IHC 等实验，是外源重组蛋白研究的经典工具抗体。

靶点背景

来源背景：HA标签（HA-Tag）源于人流感病毒血凝素（Hemagglutinin, HA）分子的98-106位氨基酸，核心序列为YPYDVPDYA（9个氨基酸短肽）

结构特性：作为线性表位标签，不形成复杂空间构象，不干扰目标蛋白的天然结构与功能，可融合在目标蛋白的N端、C端或内部区域

基因工程应用：通过分子克隆技术将HA标签序列插入表达载体，与目标蛋白基因融合表达，在原核或真核系统中高效表达融合蛋白来源背景：HA标签（HA-Tag）源于人流感病毒血凝素（Hemagglutinin, HA）分子的98-106位氨基酸，核心序列为YPYDVPDYA（9个氨基酸短肽）

结构特性：作为线性表位标签，不形成复杂空间构象，不干扰目标蛋白的天然结构与功能，可融合在目标蛋白的N端、C端或内部区域

基因工程应用：通过分子克隆技术将HA标签序列插入表达载体，与目标蛋白基因融合表达，在原核或真核系统中高效表达融合蛋白

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。