Flag Tag标签单克隆抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:DDDDK epitope tag; DDDK; ddk; DYKDDDDK; DYKDDDDK epitope tag; DYKDDDDK tag; DYKDDDDK-Tag; ECS epitope tag; ECS tag; Enterokinase Cleavage Site epitope tag; Enterokinase Cleavage Site tag; FLAG; FLAG-tag.

交叉反应:Species independent

抗体来源:Mouse

免疫原:KLH conjugated Flag Tag

亚型:IgG1

性状:Size : 50ul/100ul/500ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Recombinant

克隆号：3D7

理论分子量：

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/500ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

抗 Flag 标签单克隆抗体，特异性结合 Flag 标签多肽，亲和力高、非特异性结合低，可识别 N 端、C 端及胞内不同位置的 Flag 融合蛋白。适用于 WB、IP、IF、ELISA 等多种实验，广泛应用于重组蛋白鉴定、蛋白互作、外源基因表达研究。

靶点背景

序列组成：由8个亲水氨基酸残基组成，序列为DYKDDDDK，分子量仅约1.0 kDa

设计特点：

抗原性核心：第二位酪氨酸（Tyr）是抗体识别的关键位点，两侧带负电的天冬氨酸（Asp）形成高极性微环境，显著增强抗原-抗体结合力

酶切位点：C端五肽序列（DDDDK）构成肠激酶切割位点，允许纯化后精准切除标签，还原天然蛋白结构序列组成：由8个亲水氨基酸残基组成，序列为DYKDDDDK，分子量仅约1.0 kDa

设计特点：

抗原性核心：第二位酪氨酸（Tyr）是抗体识别的关键位点，两侧带负电的天冬氨酸（Asp）形成高极性微环境，显著增强抗原-抗体结合力

酶切位点：C端五肽序列（DDDDK）构成肠激酶切割位点，允许纯化后精准切除标签，还原天然蛋白结构

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样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。