小鼠角膜成纤维细胞 新品

小鼠角膜成纤维细胞是存在于角膜基质层中的一种细胞，对于角膜的结构和功能维持起着重要作用。该细胞能够合成和分泌胶原蛋白、蛋白多糖等细胞外基质成分，维持角膜的透明性和韧性。当角膜受到损伤时，角膜成纤维细胞会被激活，增殖并分泌更多的细胞外基质，参与角膜的修复过程。但过度的修复可能会导致角膜瘢痕形成，影响角膜的透明性，进而影响视力。此外，它还可作为研究角膜疾病发病机制及药物筛选的体外模型。
产品名称 小鼠角膜成纤维细胞

英文名称：Mouse Corneal Fibroblast Cells

货号：YS-01X7394

组织来源 眼角膜组织

种属 小鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的小鼠角膜成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的小鼠角膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠角膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

小鼠角膜成纤维细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持角膜的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

细胞组成：角膜基质层固有成纤维细胞（角膜基质细胞静息态）

形态结构：细长梭形、扁平状，排列规整，胞质透明，细胞边界纤细

分子标记：Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅴ 阳性；上皮、内皮标记阴性

功能特性：合成角膜基质胶原，维持角膜透明性与机械强度，参与角膜外伤修复、角膜瘢痕形成

合成角膜基质胶原，维持角膜厚度、韧性与透明性

角膜外伤后活化，参与创面修复与基质组织重塑

调控角膜局部炎症反应，维持眼表免疫平衡

异常活化易导致角膜浑浊、瘢痕形成影响视力

1.无菌取出组织，预冷 PBS 反复冲洗，去除血迹、气管及杂质组织。

2.将组织剪碎至 1mm³ 细小组织块，PBS 反复漂洗，去除漂浮杂质与死细胞。

3.加入混合消化液（胰酶 + 胶原酶），37℃水浴消化 20~30min，间断轻柔吹打；血清培养基加入终止消化。

4.细胞悬液过 100μm 滤网，收集滤液，300g 离心 5min，弃上清，PBS 重悬洗涤一次。

5.完全培养基重悬细胞，调整合适密度接种于培养皿；置于 37℃、5% CO₂培养箱静置培养。

6.培养 24h 后首次换液，利用差速贴壁特性：成纤维细胞贴壁快，去除未贴壁上皮等杂细胞；之后每 2~3 天换液一次。