人胃癌成纤维细胞 新品

商品属性

细胞简介

人胃癌成纤维细胞分离自患有胃癌病人的胃癌组织；胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位，胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累，绝大多数胃癌属于腺癌。在胃癌侵袭和转移的过程中，涉及诸多复杂的过程，如细胞外基质的硬化和降解、新生血管的形成等，而这些过程会直接或间接的引起肿瘤微环境(Tumor mircoenvironment)的改变。肿瘤微环境即肿瘤细胞生存的外部环境，由不同种类的非肿瘤性的细胞与细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)构成，包括纤维细胞，免疫细胞，内皮细胞，间充质干细胞等，肿瘤细胞通过调控这些间质细胞，创造出有利于自身侵袭转移的条件，从而使得肿瘤得到进展。越来越多的证据表明，肿瘤微环境的改变在肿瘤进展中扮演着重要的角色。在肿瘤微环境中，研究最多也是最主要的间质细胞是肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由肿瘤周边的正常成纤维细胞和成纤维细胞样细胞演化而来。胃癌成纤维细胞多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。刚分离的胃癌成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品信息

产品名称 人胃癌成纤维细胞

组织来源 胃癌组织

种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人胃癌成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人胃癌成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶人胃癌成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

1. 细胞组成：胃癌微环境癌相关成纤维细胞 (CAF)

2. 形态结构：活化肥大梭形，增殖迁移能力增强

3. 分子标记：FAP、α-SMA、Collagen Ⅰ

4. 功能特性：促进胃癌增殖、侵袭、腹膜转移、间质重塑

核心功能

构建胃癌肿瘤间质，分泌基质蛋白支撑肿瘤生长侵袭

分泌促癌细胞因子，促进胃癌细胞增殖、转移与浸润

诱导肿瘤微环境纤维化，增强肿瘤化疗耐药性

参与胃部慢性炎症恶变、肿瘤血管新生调控
原代细胞传代操作指南

传代时机判断

当细胞融合度达到70%-80%时进行传代，此时细胞活力最佳，避免过度融合导致接触抑制

若细胞生长缓慢或形态变差，可提前传代调整密度

具体操作步骤

预处理：提前预热培养基、胰蛋白酶和PBS，准备好无菌离心管、移液管等耗材

消化细胞：吸弃旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞表面1-2次，去除残留血清；加入适量胰蛋白酶（覆盖细胞表面即可），37℃孵育1-3分钟，期间在显微镜下观察，待细胞边缘收缩、变圆且开始脱落时终止消化

终止消化与收集：加入等量含血清的培养基中和胰蛋白酶，用移液管轻轻吹打培养瓶壁，使细胞完全脱落形成细胞悬液；将细胞悬液转移至离心管，以1000rpm离心5分钟

重悬与接种：弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞，按1:2-1:3的比例接种至新的培养瓶，补充培养基后轻轻摇匀，放入培养箱继续培养

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