Polysciences｜BioMagPlus Concanavalin A 刀豆蛋白A磁珠｜曼博生物官方提供

刀豆蛋白A磁珠产品简介

伴刀豆球蛋白A（Con A）共价修饰吸附于功能化的BioMag Plus磁性颗粒表面，用于从血清和细胞提取物中分离糖蛋白。

基于珠和柱的分离方法在很大程度上依赖于亲和结合系统的速度和简便性。诸如链霉亲和素，抗体和凝集素之类的配体，既用于捕获特异性标记的靶标蛋白，又用于分离天然表达配体结合伴侣的细胞和生物分子。植物凝集素，例如伴刀豆球蛋白A（Con A）的独特糖结合特性，使其可用于标记和分离血清和细胞裂解物中的聚糖提呈细胞和糖蛋白。凝集素还被用于细胞粘附研究，以实现淋巴细胞活化，并探索基于碳水化合物的疗法。

我们的伴刀豆球蛋白A（Con A）包被的BioMag Plus微粒为从血清或细胞裂解物中分离出含有甘露糖基和葡萄糖基的糖蛋白和多糖，或研究其他凝集素/聚糖介导的过程提供了方便的方法。 BioMag Plus磁性颗粒形式可提供高表面积，支持轻松高效的分离。

Cut & Run以及Cut & Tag技术的开发者，Henikoff博士及其研究团队使用Polysciences品牌的ConA磁珠用于该实验流程中的细胞原位固定，磁珠的使用替代了传统的离心方法，可降低实验过程中DNA的损失。

参考文献详情，可直接至文末进行下载。

刀豆蛋白A磁珠产品特点

伴刀豆球蛋白A（Con A）共价修饰吸附于功能化的BioMag Plus颗粒表面，用于从血清和细胞提取物中分离糖蛋白。

Con A是一个104,000 Da的蛋白质，由四个相同的亚基组成，并根据pH值以活性二聚体或四聚体的形式存在。它的碳水化合物结合伙伴是在α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖上的C-3，C-4和C-6位置未经过修饰的OH基团，以及蛋白质和肽的末端葡萄糖残基。 Con A凝集红细胞（RBC），与免疫球蛋白糖肽相互作用，并且是淋巴细胞有丝分裂原。它能结合某些细菌。

Con A结合是由金属离子介导的，可稳定其构象。每个结合位点都需要钙和锰离子，因此使用含有EDTA或其他金属螯合剂的缓冲液会导致碳水化合物结合能力的丧失。

刀豆蛋白A磁珠应用领域

Polysciences品牌的ConA磁珠助力CUT&RUN以及CUT&Tag技术

      刀豆蛋白A（Concanavalin A，缩写ConA），是一种植物凝集素， 具有独特的糖结合特性，使其可用于标记和分离血清和细胞裂解物中的聚糖提呈细胞和糖蛋白。 Con A共价修饰吸附于功能化的BioMag Plus磁珠表面， 在 CUT&RUN以及CUT&Tag方法 中用于细胞的原位固定。磁珠的使用替代了传统的离心方法，可降低实验过程中DNA的损失。

      2017年，Henikoff博士及其实验室的研究人员在eLife杂志上发表了一种称为CUT&RUN的新方法。CUT&RUN（Cleavage Under Targets and Release Using），即核酸酶靶向切割及释放技术。CUT&RUN实验过程及原理： 首先将细胞固定在伴刀豆球蛋白A磁珠上，然后用洋地黄皂苷通透细胞膜，加入一抗和pAG-MNase（Protein A-Protein G-微球菌核酸酶），一抗募集pAG-MNase到靶蛋白上，添加Ca2+激活pAG-MNase，并切割靶蛋白两侧的DNA，使其从基因组中释放出来，扩散到上清中。上清中的DNA纯化后进行qPCR或NG-Seq鉴定、定量。与传统的ChIP-Seq研究方法相比，CUT&RUN方法无需使用甲醛交联，不会产生因交联而导致的抗原表位被掩盖的现象，无需进行免疫共沉淀等步骤，因此该方法所需的样品数量由原来的上百万个细胞减少到不超过10万个细胞，操作时间也由原来的3天缩短到1-2天，因此具有快速、背景信号低、易操作和重复性好等优点。

      2019年4月，Henikoff博士及其实验室的研究人员在CUT&RUN技术的基础上再次创新，开发出CUT&Tag（Cleavage Under Targets and Tagmentation），又称为靶向核酸切割及标记技术。与CUT&RUN相比，CUT&Tag使用Tn5代替MNase，切割染色质同时加上建库引物接头，切割同时加接头这一步可以简化后续的建库步骤，以更快速度获得更高信噪比。CUT&Tag有望将蛋白质-DNA互作的研究变成一种类似PCR反应的常规操作，对基因调控、表观遗传等领域的研究具有重大的意义。

CUT&Tag技术原理

ChiTag是Protein A蛋白与Tn5转座酶的融合蛋白，当抗体结合目的蛋白（如转录因子、组蛋白等）后，Protein A蛋白可直接结合抗体，携带的Tn5转座酶可特异性的切割目的蛋白附近的DNA片段，并直接将DNA片段连上接头，极大简化了步骤，缩短了建库时间。

刀豆蛋白A磁珠规格参数

3ml 或 10ml Con A 包被的磁颗粒，配制在含有0.1%NaN₃的10mM PBS中

平均直径：1.0µm

浓度：5mg/ml

Con A结合：由测定A280决定

储存条件

储存于4˚C。冷冻，干燥或离心BioMag可能会导致不可逆的聚集和结合活性的丢失。建议在使用前在无菌培养基中洗涤BioMag SelectaPure anti-Human CD11b颗粒以去除防腐剂。强烈建议使用磁性分离装置进行洗涤而不是离心方式。

安全性

该颗粒悬浮液包含NaN₃。NaN₃可能与铅和铜管反应生成爆炸性金属叠氮化物。处置材料后，用大量水冲洗以防止叠氮化物积聚。请参阅Safety Data Sheet以获取更多信息。

参考文献

1. Lotan, R., G.L. Nicholson. 1979. Purification of cell membrane gly­coproteins by lectin affinity chromatography. Biochem Biophys Acta, 559(4):329-376.

2. Payne, M.J., S. Campbell, R.A. Patchett, R.G. Kroll. 1992. The use of immobilized lectins in the separation of Staphylococcus aure­us, Escherichia coli, Listeria and Salmonella spp. from pure cultures and foods. J Appl Bacteriol, 73(1):41-52.

3. Sparbier, K., T. Wenzel, M. Kostrzewa. 2006. Exploring the bind­ing profiles of Con A, boronic acid and WGA by MALDI-TOF / TOF-MS and magnetic particles. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 840(1):29-36.

4. Yahara, I., G.M. Edelman. 1972. Restriction of the mobility of lym­phocyte immunoglobulin receptors by Concanavalin A. PNAS, 69(3): 608-612.

5. Zem, G.C., et al. 2006. Microbead analysis of cell binding to immobilized lectin: an alternative to microarrays in the development of carbohydrate drugs and diagnostic tests. Acta Histochem, 108(4): 311-317.
6.Henikoff S , Skene P J . An efficient targeted nuclease strategy for high-resolution mapping of DNA binding sites[J]. eLife,6,(2017-01-06), 2017, 6.

7.Kaya-Okur, H. S. , Wu, S. J. , Codomo, C. A. , Pledger, E. S. , & Henikoff, S. . (2019). Cut&tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells. Nature Communications, 10(1), 1930.

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