Recombinant Human MDH1图片

Recombinant Human MDH1图片

商品介绍：

别称：cytoplasmic, Cytosolic malate dehydrogenase, Diiodophenylpyruvate reductase, Malate dehydrogenase, Malate dehydrogenase 1, NAD (soluble), Malate dehydrogenase cytoplasmic, MDH s, mdh1, MDHA, MDHC_HUMAN, MDHs, MGC:1375, MOR2, Soluble malate dehydrogenase

标签：N-terminal His Tag

种属：Human

宿主：E.Coli

表达区间：1-334

分子量：36.6 kDa

                 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

应用：Western Blot, ELISA

性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

该蛋白是苹果酸-天冬氨酸穿梭（MAS）系统的核心酶，主要定位于细胞质。其核心功能是催化苹果酸与草酰乙酸之间的可逆氧化还原反应，利用NAD/NADH辅因子系统，在糖酵解、糖异生、尿素循环及柠檬酸循环等多种代谢途径中发挥关键的枢纽作用，维持细胞内的氧化还原平衡。研究表明，MDH1在多种肿瘤中异常高表达，通过调控代谢重编程和重塑肿瘤免疫微环境来促进癌症进展。

重组蛋白的制备流程：

重组蛋白的制备流程主要包括以下几个关键步骤：

1.基因获取：从生物体中提取目的基因，可通过PCR技术扩增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，确保所获取的基因能编码目标重组蛋白。

2.载体构建：将获取的目的基因与合适的载体连接，常见载体有质粒、噬菌体等。载体需具备复制原点、筛选标记等元件，使目的基因能在宿主细胞中稳定复制和表达。

3.宿主细胞转化：把构建好的重组载体导入宿主细胞，如大肠杆菌、酵母细胞或哺乳动物细胞等。转化方法有化学转化法、电穿孔法等。

4.筛选与鉴定：运用抗生素筛选、PCR鉴定、测序等方法，挑选出含有重组载体的阳性克隆细胞。

5.蛋白表达：优化培养条件，诱导阳性克隆细胞表达重组蛋白。根据宿主细胞类型和蛋白特性，调整温度、诱导剂浓度等参数。

6.蛋白纯化：采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等方法，从细胞裂解液或培养液中分离纯化重组蛋白。

7.质量检测：对纯化后的重组蛋白进行纯度、活性、分子量等检测，确保其符合质量要求。

公司正在出售的产品：

收到产品后的处理：

离心收集：重组蛋白通常以冻干粉形式提供。在运输过程中，粉末可能会粘附在管壁或管盖上。因此，在开盖前，务必先进行短暂离心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），将冻干粉收集于管底。

复溶操作

选择合适的溶剂：

仔细阅读产品说明书，严格按照推荐的溶剂和浓度进行复溶。

通常使用无菌的 PBS 缓冲液或低盐缓冲液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用纯水，因为缺乏缓冲能力和合适的离子强度可能导致蛋白沉淀或失活。

轻柔混匀：

向冻干粉中加入推荐体积的溶剂，用移液器枪头轻轻吹打或缓慢上下颠倒混匀。

绝对禁止涡旋震荡，因为剧烈的剪切力会破坏蛋白质的空间结构，导致其变性失活。

如果蛋白难以溶解，可将其置于 4℃ 静置 2 小时以上或在水平摇床上低速摇晃。

达到推荐浓度：

初次复溶时，建议将蛋白浓度配制在说明书推荐的范围内（通常不低于 100 μg/mL），这有助于维持蛋白的稳定性。