大鼠免疫球蛋白游离轻链lambda(λ-IgFLC)elisa试剂盒 新品

大鼠免疫球蛋白游离轻链lambda(λ-IgFLC)elisa试剂盒

商品属性：

核心参数：

检测原理‌：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

‌种属反应性‌：大鼠

‌检测样本类型‌：血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆、尿液、唾液等

‌检测时间‌：约3.5小时

‌保存条件‌：2–8℃避光保存，有效期‌6个月‌

‌规格‌：96T / 48T（可分别检测84或42个样本 + 标准品孔）

‌灵敏度‌：‌低于1.0 ng/mL‌，可检测微量目标蛋白

‌板内/板间变异系数‌：均‌<15%‌，保证数据重复性。

夹心法数据：

注意事项：

本试剂盒‌仅供科研使用，不用于临床诊断‌；

避免样本溶血、脂血或反复冻融，以免干扰检测结果；

不同批次试剂请勿混用，防止交叉污染；

显色后应尽快读数，避免光线暴露导致信号衰减；

实验建议设置双复孔或三复孔，提升数据可靠性；

试剂使用前充分摇匀，确保均一性。

核心流程：

一、试剂准备‌

所有试剂平衡至室温（18–25℃）约20分钟；

浓缩洗涤液若出现结晶，需37℃水浴溶解后充分混匀，再用蒸馏水按1:20稀释为工作液。

‌二、标准品配制‌

将冻干标准品用1mL样本稀释液复溶，静置10分钟并轻柔颠倒助溶，得原液（如10 μg/mL）；

取6个EP管，每管加入150μL样本稀释液，依次进行倍比稀释，形成6个浓度梯度，另设空白孔（仅加稀释液）。

‌三、‘加样与孵育‌

每孔加入50μL标准品或待测样本（血清/血浆/上清等），37℃孵育60分钟；

设置双复孔或三复孔以提高数据可靠性。

‌四、洗板‌

弃去孔内液体，每孔加满1×洗涤液，静置1分钟，甩干后在吸水纸上拍干，重复5次；若使用洗板机，建议增加一次洗涤次数。

‌五、加酶标抗体‌

每孔加入100μL HRP标记的检测抗体，37℃孵育60分钟，避光进行。

‌六、再次洗板‌

同上步骤洗板5次，确保彻底去除未结合成分。

七、显色反应‌

每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟，避免光照导致信号衰减。

‌八、终止反应‌

每孔加入50μL终止液（强酸），颜色由蓝变黄，立即终止酶促反应。

‌九、读数分析‌

在15分钟内使用酶标仪于‌450 nm波长‌下测定各孔OD值；

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标，绘制标准曲线，采用线性回归或四参数Logistic拟合（R² ≥ 0.9900），计算样本浓度；

若样本经过稀释，结果需乘以稀释倍数还原实际浓度。

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