一步法超级多重荧光定量PCR试剂盒（探针） 新品

基本信息‌

‌中文名称‌：一步法超级多重荧光定量PCR试剂盒（探针）

货号：P-PR1427

规格：100反应、250反应

‌英文名称‌：One-step Ultra Multiplex Quantitative PCR Kit (Probe-based)
作用机制：将逆转录（针对RNA样本）与PCR扩增反应整合为单管体系，无需单独进行逆转录步骤；针对多个靶基因设计特异性引物与荧光探针，探针结合靶序列后，在Taq酶的5'-3'外切酶活性作用下被切割，释放荧光基团产生信号，荧光强度与扩增产物量正相关，可同时定量检测多个靶标。 

适用样本：RNA样本（如组织总RNA、病毒RNA）或DNA样本（如基因组DNA、质粒DNA）
产品概述

基于TaqMan探针技术，实现多靶标基因的一步法逆转录与定量PCR扩增，无需单独进行逆转录反应。适用于RNA病毒（如新冠、流感）的多靶点联合检测、基因表达谱分析等场景，可同时检测1-8个靶标，具备高特异性与灵敏度。

产品组成（以96次反应为例）

组分 规格

2×多重PCR反应混合液 1.2mL×2管

多重探针混合液 100μL×1管

ROX参考染料（50×） 40μL×1管

无核酸酶水 1mL×1管

阳性对照品 50μL×1管

阴性对照品 50μL×1管

产品特点

一步法操作：逆转录与PCR扩增同步完成，简化实验流程

超高多重性：支持最多8个靶标同时检测，节省样本与试剂

高特异性：采用基因特异性探针，有效避免非特异性扩增

宽线性范围：检测线性范围达6个数量级，定量准确

抗干扰强：兼容复杂样本（如血液、组织）中的抑制剂

操作步骤

试剂准备：将所有试剂室温融化，瞬时离心后置于冰上

反应体系配制（20μL体系）：

试剂 体积（μL）

2×多重PCR反应混合液 10

多重探针混合液 1

ROX参考染料 0.4

RNA模板 2-5

无核酸酶水 补至20

PCR反应设置：

逆转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 2分钟

循环扩增（40个循环）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

数据分析：采用2-ΔΔCt法进行相对定量，或通过标准曲线进行绝对定量

注意事项

试剂需避光保存，避免反复冻融，建议分装为单次使用量

操作全程需使用无核酸酶耗材，防止RNA污染

需设置阳性、阴性及无模板对照，验证反应体系可靠性

不同靶标组合可能需优化退火温度，建议通过预实验确定

荧光探针对光敏感，配制体系时需避免强光照射

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