LTV转染试剂（慢病毒）

【产品介绍】

EvaBio™ LTV transfection reagent 是一款性能优良的质粒DNA转染试剂 ，可以高效转染分 子量较大的病毒质粒 ，适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装 ，提高病毒产量 ，与其它转染试剂相 比，具有不受血清影响、转染效率高，细胞毒性低、操作便捷 ，结果稳定可重复性等优点。 

【慢病毒包装步骤】 以3质粒系统 ，6孔板为例 ，请参考表1的转染规模调整，步骤如下： ① 细胞接种: 293T细胞接种于6孔板，每 孔 接 种1.0~2.0×10 5个细胞 ，细胞培养12~24小时， 使转染时细胞密度达到60~70%融合度； ② 质粒DNA稀释: 将3µg包装质粒psPAX2,1ug包膜质粒pMD2G和4ug目的基因质粒用Opti-MEM 培养基稀释 ，稀释后的终体积为50µL ③ 转染试剂稀释: 取8μL的EvaBio™ LTV transfection reagent（ET0603）加入到42μL的 Opti-MEM培养基中 ，稀释后的终体积为50µL； ④ 复合物制备：将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合 ，轻轻吹打均匀后 ，室温静置10分钟； ⑤ 转染:将上述100ul复合物加入到6孔板中 ，轻轻吹打混匀 ，转染6-12h,更换成新鲜的细胞培养液 ，继续培养； ⑥慢病毒收集：转染48h,收集第一批含有慢病毒的细胞培养液上清 ，再加入新鲜的 2ml新鲜2ml新 鲜细胞培养液 ，24-48h后收集第二批含有慢病毒的细胞培养液上清； ⑦离心 ：3000rpm,4°C离心5min,将上清液转入新的无菌离心管中保存 ，用于后续纯化和感染。 

慢病毒包装实验优化: 可通过改变细胞密度、pDNA的浓度 ，几种构建慢病毒pDNA之间的配比以 EvaBio™ LTV Transfection Reagent （ET0603）浓度对慢病毒包装实验进行优化。保证细胞融合 度在60%以上，EvaBio™ LTV Transfection Reagent （ET0603） (µL): DNA (µg,pDNA总质量)可 以在1:1和3:1之间调整。 

不同培养板所需转染试剂和DNA的用量 

 【储存条件及保质期】 2-8℃保存 ，有效期12个月 

【适用范围】 EvaBio™ LTV transfection reagent 适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装，提高病毒产量。 

【注意事项】 1.本产品仅限于科学实验研究使用 ，不得用于临床诊断、治疗等领域。 2.细胞状态：使用健康、低代数的细胞 ，状态差会显著降低转染效率。 3. 无菌操作：全程在超净台内操作，避免污染。 4. 试剂保存：转染试剂需 2-8℃或-20℃避光保存 ，避免反复冻融。 5. 血清影响：部分转染试剂需在无血清条件下进行 ，转染后可补加血清。 6. 毒性控制：若细胞死亡明显 ，可减少试剂用量或缩短复合物作用时间