SP悬浮细胞小核酸转染试剂

基本信息‌

‌中文名称‌：SP悬浮细胞小核酸转染试剂

货号：P-PR1414

规格：0.5ml、1.0ml、1.5ml

‌英文名称‌：SP Suspension Cell Small Nucleic Acid Transfection Reagent
作用机制：针对悬浮细胞的特性设计转染载体，可高效结合小核酸并穿透悬浮细胞的细胞膜，将小核酸送入细胞内，同时减少对悬浮细胞的损伤，提高转染成功率。 

适用样本：各类悬浮细胞，如淋巴细胞、白血病细胞、杂交瘤细胞等。
产品概述

本试剂是专门针对悬浮细胞研发的小核酸转染试剂，可高效转染siRNA、miRNA mimics/inhibitor、小片段DNA等小核酸分子。在多种悬浮细胞系中表现出卓越的转染性能，部分细胞转染效率可达80%以上，且细胞毒性极低，转染后细胞存活率＞90%。

核心优势：

高效转染：适配绝大多数悬浮细胞类型，包括难转染的免疫细胞

低细胞毒性：采用生物可降解材料，对细胞生理状态影响极小

操作简便：支持含血清培养基转染，无需更换培养液

稳定性强：转染复合物室温下可稳定保存30分钟

产品组成

组分名称 规格 储存条件 有效期

悬浮细胞转染试剂 1.0mL/1.5mL -20℃ 12个月

转染增强液（仅用于质粒转染） 1.0mL -20℃ 12个月

使用说明书 1份 室温 -

注意：避免反复冻融，建议将试剂分装为单次使用量

实验准备

材料与试剂

待转染的悬浮细胞系（生长状态良好，无支原体污染）

小核酸分子（siRNA/miRNA等，纯度≥95%，无内毒素污染）

细胞培养基（含血清或无血清均可，建议使用常规培养条件）

无菌离心管（1.5mL）、移液器及吸头（无RNase/DNase）

细胞培养设备（CO₂培养箱、离心机等）

细胞预处理

转染前24小时接种细胞，调整细胞密度至2-5×10⁵ cells/mL

转染前确认细胞存活率≥90%，培养基颜色无明显变黄

无需更换培养基，直接进行转染操作

操作步骤（以24孔板为例）

小核酸转染（siRNA/miRNA）

制备转染复合物

取1.5mL无菌离心管，加入50μL无血清培养基，加入适量转染试剂（参考用量：2μL/孔）

另一离心管中加入50μL无血清培养基，加入小核酸分子（参考用量：20pmol/孔）

将小核酸溶液逐滴加入转染试剂中，轻轻混匀，室温静置15-20分钟

转染操作

将细胞培养板从培养箱取出，强烈振荡20-40秒使细胞充分分散

将转染复合物逐滴加入对应孔中，边加边轻轻晃动培养板

立即将培养板放回CO₂培养箱，37℃、5%CO₂条件下继续培养

结果检测

siRNA转染后24-72小时检测基因沉默效果

miRNA转染后48-96小时检测目标基因表达水平

质粒DNA转染（可选）

转染复合物制备

离心管A：50μL无血清培养基 + 2.5μL转染试剂 + 1μL转染增强液，混匀静置5分钟

离心管B：50μL无血清培养基 + 0.8μg质粒DNA，混匀静置5分钟

将B液逐滴加入A液中，轻轻混匀，室温静置20分钟

转染操作与检测

同小核酸转染步骤2

转染后24-96小时观察荧光蛋白表达或检测目的基因产物

优化建议

试剂比例优化

首次实验建议设置梯度：转染试剂（1.5-3.0μL）: siRNA（10-40pmol）

质粒转染可尝试转染试剂（2-4μL）: DNA（0.5-1.0μg）

细胞密度优化

转染时细胞密度可在1×10⁵-8×10⁵ cells/mL范围内调整

生长速度快的细胞可适当降低接种密度

培养基条件

血清对转染效率无明显影响，可直接使用常规培养条件

避免使用含抗生素的培养基，以免增加细胞毒性

注意事项

所有操作需在无菌条件下进行，避免RNase/DNase污染

转染复合物制备过程中避免剧烈涡旋，防止核酸分子降解

转染后24小时内避免更换培养基，以免影响转染效率

不同细胞系的转染条件存在差异，建议通过预实验优化参数

试剂应避光保存，避免长时间暴露于室温环境

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