4′,5′-二溴荧光素

一、基本参数信息

• 中文名称：4′,5′- 二溴荧光素；二溴荧光素；二溴曙红

• 英文名称：4′,5′-Dibromofluorescein；Dibromoeosin

• CAS 号：596-03-2

• 分子式：C₂₀H₁₀Br₂O₅

• 分子量：489.90

• 外观：红棕色至暗红色结晶或粉末

• 溶解性

• 微溶于水

• 溶于乙醇、丙酮、稀碱溶液

• 光谱特性（大致）

• 最大吸收：~515–525 nm

• 荧光发射：~535–545 nm（橙红色荧光）

• pH 敏感性：在碱性条件下显色与荧光更强，酸性下减弱

二、使用信息（典型应用与配制）

1. 生物染色（组织学、细胞学）

• 用于细胞质、红细胞、嗜酸性颗粒染色

• 常与苏木精等配对使用，做常规病理染色

• 0.5%～1% 乙醇溶液或水溶液

• 染色时间：1～5 min

• 水洗、脱水、透明、封片

2. 蛋白凝胶染色（SDS-PAGE）

• 作为灵敏蛋白荧光染色剂，比考马斯亮蓝更灵敏

• 常用工作浓度：0.01%～0.05%

• 步骤：固定 → 染色 → 水洗去背景 → 紫外 / 荧光观察

3. 荧光探针、指示剂

• 用于生物大分子（蛋白、抗体）标记

• 用于环境示踪、pH 荧光传感

• 也用于光敏剂、光催化体系

4. X 射线软组织造影（科研）

• 其钡盐、镧盐可用于增强软组织 X 射线 / 显微 CT 对比度

三、注意事项（安全 + 实验 + 保存）

1. 安全注意

• 对皮肤、眼睛、呼吸道有刺激性

• 操作时戴手套、护目镜、口罩，避免吸入粉尘

• 避免吞食，不可用于人体直接注射

• 废液按实验室染料 / 有机试剂废液处理，不可直排

2. 实验使用注意

• 避光保存：荧光染料易光漂白，配好的溶液尽量避光

• pH 影响大：酸性环境荧光弱，碱性更强

• 避免与强氧化剂、强还原剂混用，防止结构破坏

• 染色浓度过高易造成高背景、非特异性吸附，建议梯度摸索

3. 储存条件

• 密封、干燥、阴凉处保存

• 温度：室温～25℃以下，避免高温

• 长期保存建议4℃冷藏，避光

4. 稳定性

• 固体相对稳定

• 溶液状态易降解，建议现配现用

• 长期放置会出现荧光减弱、颜色变深