仅供科研使用,不得用于临床检验。
猴补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒
猴补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒
通用名称:猴补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒
英文名称:Monkey C4 ELISA Kit
【包装规格】
48T/96T
【预期用途】
仅供科研使用,不得用于临床检验。
需要但未提供的材料及耗材:
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后,按照建议的条件保存,校准品、包被微孔板和hrp标记抗体,有效期为14天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
【适用仪器】
半自动的酶标仪,如thermo mk3,或者国产酶标仪。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
3、血浆:肝素,edta,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
样本保存和稳定性:
样本在2-8℃条件下,可以储存72h,或者在- 20℃储存6个月。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前,所有的组分都要至少复温30min,确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。
3、底物:底物液a和b,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后15分钟内使用。
操作程序:
1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μl,样本孔加待测样本50μl,空白孔不加。
5、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μl。
6、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
7、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
8、如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
9、将底物a和b按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μl。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
10、所有孔加入终止液50μl,在酶标仪上读取各孔吸光度(od值)。
【检验结果的解释】
检测完成后,以标准品浓度做为纵坐标,对应的吸光度(od值)作为横坐标,利用计算机软件,采用四参数logistic曲线拟合(4-pl),创建标准曲线方程,通过样本的吸光度(od值),利用方程计算样品的浓度值。
如果样品被稀释,通过上述方法测的的浓度值,要乘以稀释倍数,才是样品的最终浓度。
【检验方法的局限性】
1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
技术提示:
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。
5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。
6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
7、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
废物处理:
所有使用或未使用的试剂,所有污染性的一次性材料,应当遵循传染性或潜在传染性产品的处理程序,每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别,进行废物和污物的处理,同时要严格依照有关规定对待所有的废物和污物。
【基本信息】
企业名称:上海将来实业股份有限公司
生产地址:上海市杨浦区五角场高新技术产业园区
固定电话:021-60496032 / 60484409
传真号码:021-55660885
网 址:www.jonln.com
qq号码:2880522968
邮 箱:shjlsw@163.com
公司简介:
江莱生物(中国老牌ELISA试剂盒供应商)
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