兔骨骼肌成纤维细胞 新品

兔骨骼肌成纤维细胞

产品信息：

英文名称：Rabbit Skeletal Muscle Fibroblast Cells

组织来源：骨骼肌

默认种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 实验室分离的tu骨骼肌成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测  实验室分离的兔骨骼肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔骨骼肌分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔骨骼肌成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞培养操作：

消化培养法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。

取材与剪切

同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。

将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm3），以便酶更好地发挥作用。

酶消化

将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。

终止与洗涤

加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。

接种与培养

用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10 cells/mL）。

将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。

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尽管价值巨大，但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战：

获取困难：需要从新鲜组织中分离，对取材时间（通常在4-6小时的黄金窗口期内）、无菌操作和组织活性都有极高要求。

培养苛刻：原代细胞非常脆弱，需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子，对培养环境（如温度、pH值）极为敏感。

批次差异：由于来源于不同的供体，不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异，这给实验的可重复性带来了挑战。

成本高昂：从获取、分离到培养，整个过程耗时、费力且昂贵。