小鼠冠状动脉平滑肌细胞 新品

小鼠冠状动脉平滑肌细胞

产品信息：

英文名称：Mouse Coronary Artery Smooth Muscle Cells

组织来源：冠状动脉

默认种属 小鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测  公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

 细胞简介：

小鼠冠状动脉平滑肌分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分，细胞膜上分布着多种离子通道，如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道；它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化，调节血管平滑肌的收缩及舒张功能，此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此，原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞，对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养操作：

消化培养法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。

取材与剪切

同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。

将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm3），以便酶更好地发挥作用。

酶消化

将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。

终止与洗涤

加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。

接种与培养

用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10 cells/mL）。

将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。

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尽管价值巨大，但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战：

获取困难：需要从新鲜组织中分离，对取材时间（通常在4-6小时的黄金窗口期内）、无菌操作和组织活性都有极高要求。

培养苛刻：原代细胞非常脆弱，需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子，对培养环境（如温度、pH值）极为敏感。

批次差异：由于来源于不同的供体，不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异，这给实验的可重复性带来了挑战。

成本高昂：从获取、分离到培养，整个过程耗时、费力且昂贵。