EHA105根癌土壤杆菌 新品

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产品描述：

EHA105根癌土壤杆菌是根癌土壤杆菌的一种，是植物基因工程中常用的遗传转化载体。它是在EHA101的基础上改造而来，具有更高的转化效率。该菌携带Ti质粒，可将目的基因导入植物细胞，培育转基因植物。在植物生物技术研究中具有重要应用价值。
培养基  酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化钠：10.0，琼脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃）

生长条件  30℃；18-24h；好氧；

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落形态： 大小：1-2mm 形状：圆形 边缘：整齐 透明度：不透明 颜色：浅黄色 隆起度：中间凸起 表面：明亮光滑 质地：湿润易挑起

模式菌株  未知

操作步骤  ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  科研

共享方式  公益性共享

菌种活化流程：

1. 冻干菌种活化

超净台紫外消毒 30 min，75% 酒精擦拭菌种管外壁

无菌打开冻干管，加入0.5–1 mL 无菌液体培养基，轻轻吹打溶解，室温静置 15–20 min 复苏

取全部菌液，划线接种斜面或涂布 平板

30℃恒温培养 5–7 天，至长出灰色孢子菌落

2. 甘油管 / 斜面活化

甘油管冰上缓慢解冻；斜面直接无菌操作

无菌接种环挑取菌体 / 孢子，划线分离单菌落于平板

30℃培养 5–7 天，挑取典型单菌落转接斜面，作为工作种子

3. 孢子悬液制备（发酵用）

成熟斜面加入5–10 mL 无菌 0.85% 生理盐水，轻轻刮下孢子

用无菌脱脂棉 / 玻璃珠过滤，去除菌丝，制成孢子悬液（浓度 10⁶–10⁸ CFU/mL）

4℃短期保存，或用于接种发酵培养基

菌种保存：

1. 短期保存

固体斜面/半固体：将生长良好的菌种置于 4℃ 冰箱。一般可保存数周至数月，需定期传代。

2. 长期保存

冷冻保存法（最常用）：

配制保护剂：常用 20-30% 无菌甘油。

收集菌体：刮取新鲜培养的菌苔或菌液，与保护剂混合，使菌悬液浓度达到较高密度。

分装：分装至无菌冻存管中（每管0.5-1 mL），拧紧盖子。

冷冻：置于 -80℃ 超低温冰箱或液氮中。

冻干保存法：需使用冷冻干燥机，适合长期保藏。

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