普沙根瘤菌 新品

产品名称：普沙根瘤菌

英文名：Rhizobium pusense

规格：冻干粉；斜面；平板

货号：PJZ1587

作用：分类学研究。

形态：菌落直径为2-4mm，圆形，边缘整齐，半透明，正面粉红色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

基本信息：

培养基  K2HPO4：0.5，MgSO4·7H2O：0.2，NaCl：0.1，酵母提取物：1.0，甘露醇：10.0，刚果红：0.025，琼脂：15.0，pH：7.2±0.2（25℃）

生长条件  28℃；24-48h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为2-4mm，圆形，边缘整齐，半透明，正面粉红色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

分离基物  鹰嘴豆的根际土壤

模式菌株  yes

操作步骤  ①准备上述平板2块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入2块平板，200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  分类学研究。

共享方式  公益性共享

产品描述：

普沙根瘤菌是根瘤菌属的一种革兰氏阴性杆菌，无芽孢，有极生鞭毛能运动，可与豆科植物形成共生固氮体系。它广泛分布于土壤中，通过侵染豆科植物根部形成根瘤，将大气中的氮气转化为氨，供植物吸收利用，同时从宿主植物获取碳水化合物等营养物质。该菌需氧生长，适宜温度28-30℃，在YMA培养基上生长良好，培养后形成圆形、凸起、半透明的黏液状菌落。普沙根瘤菌在农业生产中常被制成菌剂接种豆科植物种子，可提高豆科植物的产量和品质，减少化学氮肥的使用，具有重要的生态和经济效益。

菌种活化流程：

1. 冻干菌种活化

超净台紫外消毒 30 min，75% 酒精擦拭菌种管外壁

无菌打开冻干管，加入0.5–1 mL 无菌液体培养基，轻轻吹打溶解，室温静置 15–20 min 复苏

取全部菌液，划线接种斜面或涂布 平板

30℃恒温培养 5–7 天，至长出灰色孢子菌落

2. 甘油管 / 斜面活化

甘油管冰上缓慢解冻；斜面直接无菌操作

无菌接种环挑取菌体 / 孢子，划线分离单菌落于平板

30℃培养 5–7 天，挑取典型单菌落转接斜面，作为工作种子

3. 孢子悬液制备（发酵用）

成熟斜面加入5–10 mL 无菌 0.85% 生理盐水，轻轻刮下孢子

用无菌脱脂棉 / 玻璃珠过滤，去除菌丝，制成孢子悬液（浓度 10⁶–10⁸ CFU/mL）

4℃短期保存，或用于接种发酵培养基

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菌种保存：

1. 短期保存

固体斜面/半固体：将生长良好的菌种置于 4℃ 冰箱。一般可保存数周至数月，需定期传代。

2. 长期保存

冷冻保存法（最常用）：

配制保护剂：常用 20-30% 无菌甘油。

收集菌体：刮取新鲜培养的菌苔或菌液，与保护剂混合，使菌悬液浓度达到较高密度。

分装：分装至无菌冻存管中（每管0.5-1 mL），拧紧盖子。

冷冻：置于 -80℃ 超低温冰箱或液氮中。

冻干保存法：需使用冷冻干燥机，适合长期保藏。