牛肺线虫PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒专为牛肺线虫核酸检测设计，依托特异性PCR扩增原理，靶向牛肺线虫特征基因，可精准检测牛体肺部组织、痰液、粪便样本中的病原核酸。试剂盒检测快速、结果可靠，能够早期发现牛肺线虫隐性感染，助力牛呼吸系统寄生虫病的预防与精准治疗。

基础原理：

牛源肺线虫特异性 ITS2 序列，牛粪便、支气管冲洗液 DNA 特异性 PCR。

线粒体 Cytb 荧光定量探针，微量牛粪便虫卵快速检出病原。

牛呼吸道样本裂解虫体提取核酸，虫种引物扩增判定牛肺线虫寄生。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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