索氏梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒专为索氏梭状芽孢杆菌核酸检测研发，采用PCR扩增技术，靶向检测该菌种特征性基因片段，适配养殖环境样本、畜禽粪便、肠道组织样本。索氏梭状芽孢杆菌多存在于潮湿污浊的养殖环境，易引发畜禽慢性肠道感染、生长发育迟缓，隐性感染会持续影响养殖效益。本试剂盒检测精准、特异性强，可有效规避杂菌干扰，快速完成样本筛查与病原确诊，适用于规模化养殖场日常疫病监测、环境菌群管控、畜禽慢性肠道病病因排查等工作。

基础原理：

畜禽腹泻粪便细菌 DNA 提取，索氏梭菌 16S rRNA 特异性引物普通 PCR，电泳鉴定菌种。

荧光探针定量 PCR，仅与索氏梭菌靶序列结合发光，区分肠道其他梭状芽孢杆菌。

恒温 LAMP 辅助 PCR，试剂盒引物恒温扩增梭菌核酸，搭配显色体系快速肉眼判读。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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