卡氏枝孢霉PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒为卡氏枝孢霉专属真菌检测试剂，采用PCR扩增技术，靶向检测卡氏枝孢霉特异性核酸片段，适配环境样本、饲料样本、畜禽病变组织样本。卡氏枝孢霉是常见污染性真菌，易导致饲料霉变、养殖环境真菌污染，可引发畜禽皮肤、呼吸道真菌感染。本试剂盒特异性强，可精准区分卡氏枝孢霉与其他枝孢霉及真菌，检测快速、操作便捷，无需复杂真菌培养流程，适用于饲料质检、养殖环境真菌污染监测、畜禽真菌病病因确诊等场景。

基础原理：

霉变饲料、皮肤病灶真菌 DNA 提取，卡氏枝孢霉 ITS 间隔区特异性引物 PCR，电泳条带判定霉菌。

荧光探针 qPCR，靶向卡氏枝孢霉核糖体基因，区分枝孢霉属其他近缘霉菌。

真菌热裂解 PCR 体系，试剂盒高温裂解液释放霉菌基因组，消除多糖杂质对扩增的抑制。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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