基孔肯尼雅病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒采用RT-PCR检测技术，用于特异性检测样本中的基孔肯尼雅病毒核酸，适配人及动物血液、血清、组织样本。基孔肯尼雅病毒属于虫媒传播病毒，传播速度快，可引发发热、关节剧痛等症状，是人畜共患重要疫病病原。本试剂盒检测灵敏度高、特异性强，可快速完成早期感染筛查与确诊，检测周期短，能够满足疾控机构疫情监测、出入境检疫、临床疑似病例排查的需求，为虫媒传染病的防控与溯源提供精准检测支撑。

基础原理：

样本血清 RNA 提取，反转录生成 cDNA 后靶向病毒 E2 包膜基因 RT-PCR，电泳扩增条带判定病毒。

一步法 qRT-PCR，试剂盒将反转录与荧光扩增合二为一，探针实时识别病毒核酸快速定量。

多重病毒筛查 RT-PCR，引物仅特异性扩增基孔肯尼雅病毒，登革、寨卡病毒无交叉扩增。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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