斑点叉尾鮰病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒专为水产养殖领域研发，基于实时荧光PCR技术，特异性检测斑点叉尾鮰病毒核酸，适配鮰鱼鳃组织、肝胰脏、水体等样本。斑点叉尾鮰病毒是危害鮰鱼养殖的核心病原，发病快、死亡率高，幼苗感染损失惨重，传统检测难以实现早期预警。本试剂盒检测下限低、灵敏度优异，可精准检出早期隐性感染样本，快速完成疫病确诊，助力水产养殖从业者提前防控、阻断疫情扩散，广泛应用于鮰鱼育苗检疫、养殖日常疫病监测、水产疫情溯源排查。

基础原理：

鱼组织样本病毒 DNA 提取，靶向病毒 ORF89 基因特异性引物普通 PCR，电泳条带判定鮰鱼病毒感染。

水生动物专用 qPCR 荧光探针法，扩增同步荧光采集，定量鱼脾脏、肾脏内斑点叉尾鮰病毒拷贝数。

热启动荧光 PCR，抑制水体杂菌、鱼细胞 DNA 非特异性扩增，减少水产样本检测假阳性。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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