犬诺瓦克病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒基于荧光PCR检测技术，专为犬诺瓦克病毒核酸定性检测研发，适配犬粪便、肠道组织等各类临床样本。试剂盒依托特异性引物探针设计，可精准识别犬诺瓦克病毒保守基因片段，有效规避犬类其他肠道病毒的交叉干扰，特异性极强。检测流程简便高效，可快速完成样本核酸扩增与结果判读，解决传统病原分离检测周期长、检出率低的问题，适用于犬类急性肠胃炎、群体性肠道疫病的快速筛查、病因确诊及养殖场景的疫病溯源监测，为犬类肠道传染病防控提供精准的分子诊断依据。

基础原理：

试剂盒提取犬粪便、呕吐物样本总核酸，采用病毒特异性保守基因引物，经 Taq 酶介导普通 PCR 扩增犬诺瓦克病毒靶基因片段，琼脂糖电泳条带判定阳性结果。

依托实时荧光定量 PCR（qPCR）技术，引物探针靶向病毒衣壳蛋白编码区，扩增过程同步释放荧光信号，依靠 Ct 值定量样本内病毒载量。

采用反转录 PCR（RT-PCR）原理，先将病毒 RNA 反转录为 cDNA，再进行特异性扩增，仅识别诺瓦克病毒 RNA 模板，排除 DNA 杂质交叉干扰。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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