大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争法酶联免疫吸附检测原理，将大鼠皮质醇（Cortisol）抗原包被于酶标板固相载体上。检测时，样本与标准品中的内源性皮质醇会与板上包被的固相抗原竞争结合特异性酶标抗体，孵育反应后通过洗涤去除未结合的组分。随后加入底物显色液，结合的酶标抗体可催化底物发生显色反应，显色深浅与样本中皮质醇的含量呈负相关，即样本中皮质醇浓度越高，竞争结合的酶标抗体越少，显色越浅。反应终止后测定吸光度，依据标准曲线即可定量检测大鼠样本中皮质醇的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限值0.08ng/mL，可精准检测大鼠血清、血浆中极低浓度皮质醇含量。

检测范围：0.2ng/mL - 20ng/mL，适配大鼠应激、内分泌紊乱等不同模型的皮质醇水平检测。

反应时间：全流程反应时长120分钟，分两次37℃温育，分步完成抗原抗体结合与显色反应。

保存条件：所有试剂组分2 - 8℃避光冷藏，酶标板拆封后剩余孔板用封口膜密封，防止挥发、污染。

有效期：原装未拆封试剂盒有效期12个月，长期保存需避免温度波动。

特异性：仅特异性结合大鼠皮质醇，与皮质酮、醛固酮等同类甾体激素交叉反应率＜1%，特异性极高。

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，平行样本检测数据一致性高。

注意事项：血浆样本需采用EDTA抗凝，不可使用肝素抗凝；样本采集后需低温离心分离，避免激素降解；显色时间需严格统一，防止读数偏差。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

1. 试剂盒组分室温复温 25min，浓缩洗涤液定容稀释；血清样本室温融化，低速离心去除杂质沉淀。

2. 酶标板分区标记孔位，标准品孔添加系列浓度 Cortisol 标准品 50μL，样本孔加入预处理大鼠血清样本 50μL，空白孔空置不加样。

3. 一步法直接向除空白孔外所有孔加入酶偶联抗体工作液 100μL，封板膜严实封口防止液体挥发。

4. 37℃恒温环境避光孵育 45min，孵育期间不可随意挪动酶标板位置。

5. 掀开封板膜，倒扣弃液，每孔注满洗涤液静置 25s，反复洗板 4 次，吸水纸彻底拍干微孔残留洗液。

6. 按顺序每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，轻晃酶标板混匀，37℃避光避光显色 12min。

7. 加入终止液 50μL 终止反应，混匀后即刻用酶标仪 450nm 测 OD 值，拟合标准曲线换算皮质醇含量。