大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的大鼠膀胱肿瘤抗原（BTA）特异性抗体包被于酶标板微孔内，形成固相抗体。实验过程中，样本、标准品中的大鼠BTA会与固相抗体特异性结合，充分孵育洗涤后，加入酶标记的检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的免疫复合物。经过彻底洗板去除未结合的游离物质后，加入底物液进行显色反应，在酶的催化下底物产生有色产物，最后加入终止液终止反应，通过酶标仪测定对应波长下的吸光度值，吸光度值与样本中大鼠BTA的含量呈正相关，结合标准曲线即可精准计算出样本中BTA的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度可达0.15ng/mL，可精准捕捉样本中微量BTA表达，无假阴性检测偏差。

检测范围：0.3ng/mL - 8ng/mL，覆盖大鼠生理及病理状态下膀胱肿瘤抗原常规表达区间，适配多数实验样本检测需求。

反应时间：整体实验操作时长90分钟，包含温育、洗板、显色、终止全流程，无需过夜孵育。

保存条件：试剂盒未开封组分2 - 8℃冷藏保存，严禁冷冻；开封后酶标板密封避光2 - 8℃存放，避免受潮污染。

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月，严格按保存条件存放可保证试剂活性稳定。

特异性：特异性识别大鼠BTA抗原，与大鼠其他肿瘤标志物、膀胱组织常规蛋白无交叉反应，检测特异性强。

重复性：板内变异系数CV≤6%，板间变异系数CV≤8%，实验重复性良好，数据波动小。

注意事项：实验样本需避免溶血、脂血，浑浊样本需提前离心澄清；温育过程需严格避光，温度恒定在37℃；洗板需彻底，避免残留洗液影响显色结果。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 提前将试剂盒所有试剂、待测样本从冷藏环境取出，室温平衡 30min；浓缩洗涤液按说明书比例用蒸馏水稀释配制备用。

2. 取出酶标板，设定空白孔、标准品孔、待测样本孔，标准品孔依次加入梯度稀释后的 BTA 标准品 50μL，样本孔加入稀释后待测上清 / 血清样本 50μL，空白孔不加任何液体。

3. 每孔直接加入酶标记结合工作液 100μL（一步法无需预先孵育包被，同步加酶结合物），封板膜密封酶标板。

4. 置于 37℃恒温孵育箱避光孵育 60min，全程避免酶标板受热不均与强光直射。

5. 小心揭去封板膜，弃去孔内全部液体，每孔加满稀释后洗涤液，浸泡 30s 后甩干，重复洗板 5 次，最后一次拍干孔内残留液体。

6. 所有孔依次加入显色液 A 液 50μL、显色液 B 液 50μL，轻柔震荡混匀，37℃避光显色 15min。

7. 每孔立即加入终止液 50μL 终止显色反应，酶标仪设置 450nm 波长，15min 内读取各孔 OD 吸光度值，根据标准曲线计算样本 BTA 浓度。