大鼠内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白 新品

大鼠内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白适配内皮素生成通路、血管收缩调控、高血压病理机制及酶底物切割活性分析实验。

型号：YS-DB2115

产品名称：大鼠内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)

酶与激酶

心脑血管

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：Cell membrane; Single-pass type II membrane protei

预测分子量：30.8kDa

实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：His214~Ala448 with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：6.0

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

蛋白酶亚型特异性识别：抗体靶向 ECE1 重组蛋白催化结构域抗原位点，区分 ECE2 同源蛋白。

夹心复合物酶促显色反应：夹心免疫结构催化底物变色，吸光度与重组蛋白浓度正相关。

标准曲线定量测算：ECE1 梯度纯品建立线性关系，精确定量样本蛋白浓度。

封闭降低非特异背景：封闭固相空白位点，阻断杂蛋白非特异性黏附干扰基线。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。