大鼠磷酸二酯酶3A(PDE3A)重组蛋白 新品

大鼠磷酸二酯酶3A(PDE3A)重组蛋白适配环核苷酸代谢研究、心肌功能调控、酶活性测定与 PDE 靶向抑制剂筛选实验。

型号：YS-DB1575

产品名称：大鼠磷酸二酯酶3A(PDE3A)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Phosphodiesterase 3A, cGMP Inhibited (PDE3A)

CGI-PDE; Cyclic GMP-inhibited phosphodiesterase A; cGMP-inhibited 3',5'-cyclic phosphodiesterase A

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞膜

预测分子量：51.9kDa

实际分子量：62kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Leu948~Leu1141 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：4.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

抗原特异性免疫结合：抗大鼠 PDE3A 抗体专一识别重组 PDE3A 催化结构域抗原表位，不结合其他磷酸二酯酶亚型。

夹心结构产生酶促信号：“捕获抗体 - PDE3A - 酶标检测抗体” 复合物催化底物显色，信号强度正比于蛋白含量。

标准品线性定量：梯度稀释 PDE3A 纯品制作标准曲线，定量检测重组蛋白样本浓度。

封闭降低非特异背景：封闭液填充载体空白位点，抑制杂蛋白非特异性吸附，减少假阳性结果。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。