磷酸化干扰素调节因子3重组兔单抗

磷酸化干扰素调节因子3重组兔单抗

原理特点

该重组兔单抗高特异性识别磷酸化IRF3，检测灵敏度更高，可精准量化天然免疫活化水平；强效阻断活化IRF3的转录功能，特异性抑制抗病毒干扰素应答，适用于高精度天然免疫机制研究。
英文名称:phospho-IRF3 (Ser386) Recombinant Rabbit mAb
中文名称:磷酸化干扰素调节因子3重组兔单抗

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:IRF3(S386); IRF3(phospho S386); IRF3(phospho Ser386); p-IRF3(Ser386); p-IRF3(S386); Interferon regulatory factor 3; IRF 3; IRF-3; IRF3; IRF3_HUMAN; MGC94729.

交叉反应:Human

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human IRF3 around the phosphorylation site of Ser386

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Recombinant

克隆号：28C3

理论分子量：47 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

靶点背景：IRF3 磷酸化活化启动机体抗病毒干扰素应答，是天然免疫第一道信号节点。

抗体原理：重组兔单抗体外稳定表达，靶向 IRF3 专属磷酸活化表位，无动物批次差异。

产品特点：多色免疫荧光、单细胞多重标记适配性好，适合抗病毒药物高通量筛选标准化实验。
核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。

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