磷酸化叉头蛋白家族1(Ser319)抗体 新品

磷酸化叉头蛋白家族1(Ser319)抗体

原理特点

该抗体特异性识别FoxO1蛋白Ser319位点磷酸化修饰，精准检测该特定位点的活化状态，该位点磷酸化直接调控FoxO1核输出与失活，参与糖代谢、细胞周期调控，可用于位点特异性的通路活化检测与功能干预。
英文名称:phospho-FoxO1 (Ser319) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化叉头蛋白家族1(Ser319)抗体

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:FOXO1A(phospho S319); p-FOXO1A(phospho S319); FKHR(phospho-Ser319); Forkhead box protein O1; Afxh; AI876417; FKHR; Fkhr1; Foxo1a; Forkhead; FKH 1; FKH1; FKH1; FKHR; FKHR; Forkhead(Drosophila) homolog 1(rhabdomyosarcoma); Forkhead(Drosophila) homolog 1(rhabdomyosarcoma); Forkhead box O1; Forkhead box protein O1; Forkhead box protein O1A; Forkhead in rhabdomyosarcoma; Forkhead, Drosophila, homolog of, in rhabdomyosarcoma; FOXO1; FOXO1; FOXO1_HUMAN; FOXO1A.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human FoxO1 around the phosphorylation site of Ser319

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：72 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：Preservative: 0.02% Proclin300, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH7.4.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

靶点背景：FOXO1 调控糖脂代谢、肌肉分化、肿瘤凋亡；Ser319 位点磷酸化是 AKT 通路介导其胞质滞留失活的关键修饰位点。

抗体原理：人工合成仅 Ser319 磷酸修饰的 FOXO1 多肽免疫，位点绝对特异性，不识别 FOXO1 其他磷酸位点及 FOXO3/4。

产品特点：单位点精准检测，可解析 FOXO1 不同修饰位点的差异化调控功能，多用于糖尿病、肌肉萎缩、妇科肿瘤精细通路研究。
核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。

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