磷脂酰肌醇激酶单克隆抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:P85A_HUMAN; Phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit alpha; GRB1; PI3-kinase regulatory subunit alpha; PI3K regulatory subunit alpha; PtdIns-3-kinase regulatory subunit alpha; Phosphatidylinositol 3-kinase 85 kDa regulatory subunit alpha(PI3-kinase subunit p85-alpha; PtdIns-3-kinase regulatory subunit p85-alpha); PI 3-kinase p85α; PI 3-kinase p85 α; PI 3-kinase p85-α; SH3_PI3K_p85alpha; PI3-kinase p85 subunit alpha; phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 1; p85; AGM7; IMD36; p85-ALPHA; PI 3 Kinase p85 alpha;

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Mouse

免疫原:Recombinant mouse PI3K p85 Protein

亚型:IgG

性状:Size : 50ul/100ul/200ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Monoclonal

克隆号：5C11

理论分子量：80 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/200ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该单克隆抗体高特异性识别PI3K激酶保守抗原表位，特异性强、无内源交叉干扰，可精准靶向PI3K功能蛋白。其可高灵敏度检测PI3K表达与活化水平，精准量化通路活性；同时可强效封闭激酶活性位点，高效抑制PI3K下游信号传导，适配高精度定量实验、靶向干预实验与肿瘤通路机制研究。

靶点背景

靶点背景：识别 PI3K 家族保守催化结构域，覆盖 α/β/δ/γ 主流 I 类催化亚基，快速检测整体 PI3K 总表达量。

作用机制：杂交瘤制备单克隆，结合家族保守抗原表位，广谱识别全部 I 类 PI3K 催化蛋白。

产品特点：初筛整体 PI3K 通路水平，无法分亚型；适合高通量样本通路活性初筛，后续搭配亚型抗体精细区分。

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。