磷酸化自噬相关蛋白1抗体

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:ULK1(phospho S556); ULK1(phospho Ser556); p-ULK1(Ser556); ATG 1; ULK1; ATG1; ATG1A; Serine/threonine protein kinase ULK1; Serine/threonine protein kinase Unc51.1; ULK 1; Unc 51(C. elegans) like kinase 1; UNC 51; Unc 51 like kinase 1; Unc-51-like kinase 1; Unc-51 like kinase 1(C. elegans); UNC51; ULK1_HUMAN; Serine/threonine-protein kinase ULK1; Autophagy-related protein 1 homolog; hATG1.

交叉反应:Human,Mouse,Rat,Rabbit

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG1/ULK1 around the phosphorylation site of Ser556

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：116 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该抗体靶向磷酸化活化的自噬相关蛋白1，该蛋白磷酸化修饰是细胞自噬体组装、自噬通路启动的关键活化步骤，调控细胞自噬、代谢稳态与应激存活。该抗体可精准检测蛋白磷酸化水平，评估细胞自噬活化程度；同时可封闭磷酸化功能位点，抑制自噬通路启动，阻断细胞保护性自噬，助力研究肿瘤耐药、细胞应激损伤、代谢调控机制。

靶点背景

靶点背景：ULK1 是自噬启动关键激酶，AMPK、mTOR 通过磷酸化调控 ULK1 活性；营养匮乏、氧化应激时 ULK1 磷酸化升高，启动自噬流。

作用机制：特异性识别 ULK1 活化磷酸化位点，不识别总 ULK1 蛋白，直观反映自噬起始通路激活程度。

产品特点：免疫荧光可定位胞内自噬起始斑点，WB 定量活化水平；用于代谢疾病、肿瘤自噬耐药、神经细胞自噬清除损伤研究。

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样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。