磷酸化MLKL单克隆抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:phospho-MLKL(S358); p-MLKL(S358); MLKL(p-S358); hMLKL; Mixed lineage kinase domain like; Mixed lineage kinase domain like protein; Mixed lineage kinase domain-like protein; mixed lineage kinase domain like pseudokinase; MLKL_HUMAN.

交叉反应:

抗体来源:Mouse

免疫原:KLH conjugated Synthesised monomethylpeptide derived from human MLKL around the phosphorylation site of Ser358

亚型:IgG

性状:Size : 50ul/100ul/200ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Monoclonal

克隆号：8C4

理论分子量：54 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/200ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

磷酸化MLKL是细胞程序性坏死的特异性活化标志物，MLKL磷酸化后发生构象改变，定位细胞膜引发膜破裂，介导细胞坏死。该单克隆抗体特异性识别MLKL磷酸化位点，可精准标记坏死活化细胞、定量检测坏死水平；同时可阻断活化MLKL的膜损伤功能，抑制细胞程序性坏死进程。

靶点背景

靶点背景：MLKL 是程序性坏死（Necroptosis）执行蛋白，Thr357/Ser358 磷酸化后寡聚打孔破坏细胞膜，区别于凋亡通路。

作用原理：杂交瘤单抗定向结合 MLKL 坏死特异性磷酸化位点，不识别静息总 MLKL。

产品特点：程序性坏死专属标志物，信噪比高；用于缺血器官损伤、感染坏死、肿瘤坏死诱导药物筛选。

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实验操作过程注意事项

抗体稀释

使用专用抗体稀释液或含BSA的缓冲液稀释抗体，避免用纯水稀释（纯水中无盐分会导致抗体变性）；

严格按照说明书的建议稀释比例进行稀释，若说明书未提供，可通过预实验确定最佳稀释比例（通常1:500-1:10000）；

稀释后的抗体需一次性用完，未用完的部分不可再次冻存。

抗体孵育

一抗孵育：通常4℃孵育过夜，可减少非特异性结合，避免室温孵育时间过长导致抗体变性；

二抗孵育：室温孵育1-2小时，孵育期间需避光（荧光二抗）；

孵育时需保证抗体均匀覆盖样本表面，避免产生气泡；

实验过程中使用封闭液（如5%BSA或脱脂牛奶）封闭非特异性结合位点，减少背景信号。

洗涤步骤

每步孵育后，需用PBST或TBST洗涤3-5次，每次5分钟，彻底去除未结合的抗体；

洗涤时需轻轻晃动培养板或载玻片，避免用力过猛导致样本脱落；

洗涤液需新鲜配制，避免使用过期或变质的洗涤液。