磷酸化Akt1重组兔单抗 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:Akt(phospho-Ser473); AKT(phospho-S473); AKT(phospho S473); p-AKT(Ser473); AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PRKBA; Protein Kinase B alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt; RAC alpha; RAC alpha serine/threonine protein kinase; RAC; RAC PK alpha; Rac protein kinase alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; RAC-alpha serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-alpha; v akt murine thymoma viral oncogene homolog 1; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Akt1 around the phosphorylation site of Ser473

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Recombinant

克隆号：12A1

理论分子量：56 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

磷酸化Akt1是Akt1蛋白的活化形式，为PI3K/Akt通路核心活化标志物，调控细胞存活、增殖、代谢与抗凋亡过程。该重组兔单抗可高特异性识别磷酸化位点特异性抗原，不结合总Akt1与非磷酸化蛋白，精准检测Akt1活化水平；可特异性阻断磷酸化Akt1介导的下游存活信号，抑制细胞异常增殖与抗凋亡活性，适用于肿瘤、代谢通路精准研究。

靶点背景

靶点背景：Akt1 丝苏氨酸激酶，磷酸化位点 Ser473/Thr308 为活化形式，主控细胞存活、增殖、肿瘤耐药、代谢调控。

作用原理：重组兔单抗特异性结合磷酸化修饰位点肽段，完全不识别总 Akt1 非活化蛋白。

产品特点：修饰位点专一、背景极低，批次稳定可重复；用于 PI3K/Akt 通路活化定量、靶向药物抑制效果验证、肿瘤预后分级。

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实验优化与注意事项

抗体浓度优化

方阵滴定法：设置一抗浓度梯度（如1:200, 1:500, 1:1000）和二抗浓度梯度，选择信噪比最高的组合

预实验：首次使用建议进行浓度梯度预实验，确定最佳工作浓度

样本处理要点

细胞样本：贴壁细胞用细胞刮收集，悬浮细胞离心收集，尽量吸尽上清避免残留培养基

组织样本：新鲜组织建议液氮速冻后-80℃保存，避免反复冻融

磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制剂防止蛋白去磷酸化

结果判断与分析

WB：观察是否出现特异性条带，阴性对照应无条带或明显弱于阳性对照

IHC：阳性信号应定位于目标蛋白的正常亚细胞结构（如细胞核、细胞膜）

IF：观察荧光信号是否与目标蛋白亚细胞定位一致，DAPI染色定位细胞核