雷帕霉素靶蛋白重组兔单抗 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:FKBP12; dJ576K7.1(FK506 binding protein 12 rapamycin associated protein 1); FK506 binding protein 12 rapamycin associated protein 1; FK506 binding protein 12 rapamycin associated protein 2; FK506 binding protein 12 rapamycin complex associated protein 1; FK506 binding protein12-rapamycin associated protein 1; FK506 binding protein12-rapamycin associated protein 2; FK506-binding protein 12-rapamycin complex-associated protein 1; FKBP rapamycin associated protein; FKBP12 rapamycin complex associated protein; FKBP12-rapamycin complex-associated protein; FLJ44809; FRAP; FRAP1; FRAP2; Mammalian target of rapamycin; Mechanistic target of rapamycin; mTOR; MTOR_HUMAN; OTTHUMP00000001983; RAFT1; Rapamycin and FKBP12 target 1; Rapamycin associated protein FRAP2; Rapamycin target protein 1; Rapamycin target protein; RAPT1; Serine/threonine-protein kinase mTOR.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:A synthesized peptide derived from human mTOR

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Recombinant

克隆号：3A10

理论分子量：289 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该重组兔单克隆抗体通过基因重组技术制备，对雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抗原具有更高的亲和力与特异性，非特异性结合极低。其可精准靶向识别mTOR靶蛋白，适用于高灵敏度的免疫印迹、免疫组化、流式检测，精准定量蛋白表达；同时可强效阻断mTOR激酶活性，高效抑制下游增殖、代谢信号通路，是高精度mTOR通路靶向干预与机制研究的核心工具抗体。

靶点背景

靶点背景：靶标同为 mTOR 总蛋白，重组抗体采用体外基因表达，无动物免疫流程，靶向单一精准表位。

作用原理：基因工程构建兔 IgG 全长序列，体外稳定表达高亲和力抗 mTOR 单抗，抗原结合特异性远高于传统杂交瘤单抗。

产品特点：批次完全均一、无动物源杂质、信噪比极高，适配多重荧光 mIHC、大样本标准化定量；高分文献、临床前置验证首选。

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。